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高效液相色谱技术(HPLC)

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发表于 2022-9-7 10:26:16 | 显示全部楼层 |阅读模式
  高效液相色谱技术(HPLC)
  尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MALDI-TOF-MS鉴定收集的组分,从而在两种细胞中的差异表达中对蛋白质进行定量分析。多维液相色谱作为一种新型分离技术,不存在相对分子质量和等电点的限制,通过不同模式的组合,消除了二维凝胶电泳的歧视效应,具有峰容量高、便于自动化等特点。二维离子交换-反相色谱(2D-IEC-RPLC)是蛋白质组学研究中最常用的多维液相色谱分离系统。
  水质分析飞行时间质谱技术
  表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术于2002 年由诺贝尔化学奖得主田中发明,刚刚产生便引起学术界的高度重视。SELDI 技术是蛋白质组学研究中比较理想的技术平台,其全称是表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-tof)。其方法主要如下:通常情况下将样品经过简单的预处理后直接滴加到表面经过特殊修饰的芯片上,既可比较两个样品之间的差异蛋白,也可获得样品的蛋白质总览。因此,在应用方面具有显著优势。SELDI 技术分析的样品不需用液相色谱或气相色谱预先纯化,因此可用于分析复杂的生物样品。SELDI 技术可以分析疏水性蛋白质,PI 过高或过低的蛋白质以及低分子质量的蛋白质( < 25 000) ,还可以发现在未经处理的样品中许多被掩盖的低浓度蛋白质,增加发现生物标志物的机会。SELDI 技术只需少量样品,在较短时间内就可以得到结果,且试验重复性好,适合临床诊断及大规模筛选与疾病相关的生物标志物,特别是它可直接检测不经处理的尿液、血液、脑脊液、关节腔滑液、支气管洗出液、细胞裂解液和各种分泌物等, 从而可检测到样品中目标蛋白质的分子量、PI、糖基化位点、磷酸化位点等参数。
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发表于 2022-9-7 10:26:32 | 显示全部楼层
你喜欢贴子还是发贴子的人
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发表于 2022-9-7 10:26:44 | 显示全部楼层
@,@..是什么意思呀?
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发表于 2022-9-7 10:27:15 | 显示全部楼层
青春就像卫生纸。看着挺多的,用着用着就不够了。
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发表于 2022-9-7 10:28:06 | 显示全部楼层
呵呵,找个机会...
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发表于 2022-9-7 10:28:21 | 显示全部楼层
我该不会是最后一个顶的吧
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发表于 2022-9-7 10:28:42 | 显示全部楼层
11111111
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发表于 2022-9-7 10:28:55 | 显示全部楼层
强人,佩服死了。呵呵,不错啊
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发表于 2022-9-7 10:29:10 | 显示全部楼层
一个个全都骑到老大头上来了...
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发表于 2022-9-7 10:29:42 | 显示全部楼层
dddddddddddddd
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